潔凈室浮游菌檢測標準操作規程

⒈ 目的：建立浮游菌檢測的標準操作程序，用以規范員工的檢測操作。

⒉ 范圍：適用于公司內部生產潔凈區內的浮游菌檢測工作

⒊ 責任：生產部、生產車間、質量管理部、QC檢驗室主任、檢驗員對本規程的執行負責。

⒋ 檢測依據：GB/T16293—1996（醫藥工業潔凈室浮游菌的測試方法）。

⒌ 內容：

5.1 器具與材料

5.1.1 浮游菌采樣器

5.1.2 真空抽氣泵

5.1.3 培養皿

5.1.4 普通肉湯培養基

5.1.5 恒溫培養箱

5.2 測試步驟

5.2.1 測試前，儀器、培養皿表面必須嚴格消毒。

5.2.1.1 采樣品在進入被測前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被 測房間內。

5.2.1.2 用消毒劑擦凈培養皿的外表面。

5.2.1.3 采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面，采樣結束，于用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。

5.2.1.4 采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的及外壁及內壁進行消毒時，應將管中的殘留液倒掉并晾干。

5.2.1.5 采樣者應穿戴與被測潔凈區域相應的工作服，在轉盤上放入或調換培養皿前，雙手用消毒劑消毒。

5.2.2 采樣程序

5.2.2.1 儀器經消毒后先不放入培養皿，開動真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發，時間不少于5分鐘，并調好流量、轉盤轉速。

5.2.2.2 關閉真空泵，放入培養皿，蓋上蓋子后調節采樣器縫隙高度。

5.2.2.3 置采樣口于采樣點后，依次開啟采樣器、真空泵、轉動定時器，根據采樣量設定采樣時間。

5.2.3 培養

全部采樣結束后，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。

在30～35℃培養箱中培養，時間不少于48小時。

每批培養基應有對照試驗，檢驗培養基本身是否污染。可每批選定3只培養皿作對照培養。

5.2.4 菌落計數

5.2.4.1 用肉眼直接計數、標記或在菌落計數器上點計，然后用5～10倍放大鏡檢查，看是否有遺漏。

5.2.4.2 若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數。

5.3 注意事項

5.3.1 采樣器的采樣口必須用便于消毒及化學性能穩定的材料制造。

5.3.2 采樣管嚴禁滲漏，內壁應光滑。

5.3.3 采樣管的長度應根據測點的高度定，盡量減少彎曲。

5.3.4 使用前應仔細檢查每個培養皿的質量，培養基及培養皿有變質、破損或污染的不能使用。

5.3.5 操作時應防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。

5.3.6 對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。

5.3.7 由于細菌各類繁多，差別甚大，計數時一般用透射光于培養皿背面或下面仔細觀察，不要漏計培養皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落或培養基沉淀物的區別，必要時用顯微鏡鑒別。

5.4 測試規則

5.4.1 測試狀態

5.4.1.1  浮游菌測試前，被測試 （區）溫、濕度須達到規定的要求，靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。

5.4.1.2 浮游菌測試前，被 測試潔凈室（區）已經過消毒。

5.4.1.3 測試狀態有靜態和動態 兩種，測試狀態的選擇必須符合生產的要求，并在報告中注明測試狀態。

5.4.2 測試人員

5.4.2.1 測試人員必須穿戴符合環境級別的工作服。

5.4.2.2 靜態測試時，室內測試人員不得多于2人。

5.4.3 測試時間

5.4.3.1 對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應在凈化空調系統正常運行不少于10分鐘后開始。

5.4.3.2 對非單向流，如10000級，及其以上的凈化房間，測試應在凈化空調系統正常運行不少于30分鐘后開始。

5.4.4 浮游菌濃度計算

5.4.4.1 采樣點數量及其布置

5.4.4.1.1 最少采樣點數目：浮游菌測試的最少采樣點數目分為日常監測及環境驗證兩種情況，具體情況見下表。

最少采樣點數目

5.4.4.1.2  采樣點的位置

5.4.4.1.2.1 對每個100級潔凈操作區域（如層流罩、層流工作臺），可在離藥物敞開口處30cm處設測點。

5.4.4.1.2.2 對每個10000級潔凈工作區域（如藥物開口工作區）可在工作面處設測點。

5.4.4.1.2.3  送風口測點位置離開送風面30cm左右。

5.4.4.1.2.4 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。

5.4.4.2 最小采樣量

采樣量根據日常檢測及環境驗證定，每次最小采樣量見下表。

最小采樣量

5.4.4.3 采樣次數：每個采樣點一般采樣一次。

5.4.5 采樣注意事項

5.4.5.1 對于單向流功送風口，采樣器采樣管口朝向應正對氣流方向；對于非單向流，采樣管口向上。

5.4.5.2 布置采樣點時，至少應離開塵粒較集中的回風口1m以上。

5.4.5.3 采樣時，測試人員應站在采樣口的下風側。

5.5  記錄：對測試情況進行記錄（房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態等）。

5.6  結果計算

用計數方法得出各個培養皿的菌落數。

每個測點的浮游菌平均濃度的計算見下式。

                        菌落數

平均濃度（個ㄍm3）= —————

                        采樣量